蝙蝠的天敌主要有蛇类、猛禽(猫头鹰、鹰)、蜥蜴和猫科动物。
“没有翅膀不会飞”这个限定，正好把天敌分成两类来说：
不会飞的天敌：主要是蛇类和蜥蜴。它们会潜伏在蝙蝠栖息的洞穴、树洞里，趁蝙蝠休息时偷袭。 一些小型猫科动物(比如山猫、灵猫)也会在蝙蝠飞低时跳起来捕捉。
会飞的天敌：主要是猛禽，比如猫头鹰(特别是鹰鸮)和鹰。它们夜间视力好，能直接在空中抓捕蝙蝠。
需要留意的是，像蜘蛛、蜈蚣偶尔也能捕到蝙蝠，但通常只是“碰巧抓到”，算不上真正的天敌。 另外，人类对蝙蝠的威胁(捕食、破坏栖息地)比任何自然天敌都大。
大部分蝙蝠选择昼伏夜出，主要就是为了避开白天活动的猛禽和蛇类。
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